電泳槽的使用方法及注意事項

        所謂電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運動(dòng)。由于電荷和分子量不同，不同的物質(zhì)在電場(chǎng)中以不同的速度移動(dòng)。根據這一特點(diǎn)，可以利用電泳對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。 ，或某種混合物用于成分分析或單成分提取制備，在臨床試驗或實(shí)驗研究中具有極其重要的意義。電泳儀就是根據上述原理設計制造的。下面簡(jiǎn)單介紹一下它的用法和注意事項。
        如何使用
        1、先用電線(xiàn)將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端連接起來(lái)，注意不要接反。
         2、將電泳儀的電源開(kāi)關(guān)轉到關(guān)閉位置，將電壓旋鈕轉到較小的位置，根據工作需要選擇電壓電流的電壓電流范圍。
         3. 打開(kāi)電源，緩慢轉動(dòng)電壓調節旋鈕，直到達到所需電壓，設置電泳終止時(shí)間，然后開(kāi)始電泳。
         4、工作完成后，轉動(dòng)旋鈕開(kāi)關(guān)至零位或關(guān)閉狀態(tài)，拔出電泳插頭。
        筆記
        1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后，嚴禁人體接觸電極、電泳物體等可能帶電的部位，也不得在電泳槽內取放東西。如有必要，請先關(guān)閉電源，以免觸電。同時(shí)儀表必須有良好的接地端子，防止漏電。
         2、儀器通電后，請勿臨時(shí)加拔輸出引線(xiàn)插頭，以防短路。雖然儀器裝有保險絲，但短路仍可能對儀器造成損壞。
         3.由于不同介質(zhì)支撐的電阻值不同，電泳時(shí)通過(guò)的電流量也不同，游泳速度和到達終點(diǎn)所需的時(shí)間也不同。因此，不同介質(zhì)載體的電泳不應在同一臺電泳儀上同時(shí)進(jìn)行。
         4、當總電流不超過(guò)儀表額定電流（電流量程較大）時(shí)，可以多槽聯(lián)合使用，但一定要注意不要帶載，否則容易影響儀表壽命。
         5、在某些特殊情況下，當需要檢查儀器的電泳輸入時(shí)，允許在穩態(tài)下空載開(kāi)機，但在穩態(tài)下開(kāi)機前必須先接負載，否則電壓表指針會(huì )跳的很大，容易造成不必要的人機損壞。
         6、在使用過(guò)程中如發(fā)現異?，F象，如巨響、放電、異味等，必須立即切斷電源進(jìn)行維修，以免發(fā)生事故。
        夾層式立式電泳槽使用方法：
        一、零部件
        (一)鉑絲儲罐一對，配備冷卻裝置和電泳緩沖液出口。
         (二)凹膠框，配玻璃板，可制作厚度分別為1mm和1.5mm的凝膠板。操作時(shí)，選擇合適厚度的玻璃板和梳子配套使用。
         (3) 樣品孔模具（梳子）用于電泳加載。
         (4) 固定儲液罐的螺釘和螺母有4對，28D和30型有5對。
         (5) 五個(gè)橡膠管。兩個(gè)長(cháng)的用來(lái)連接冷卻水的進(jìn)出水口；兩個(gè)中長(cháng)的用于連接電極緩沖器；介質(zhì)液體出口；較短的一根用于連接儲罐之間的冷卻水。
         (六)電線(xiàn)1對。 2. 使用方法
        (一)清洗零件
        上述零件在組裝前必須*清潔。尤其是玻璃板和凹槽膠框，必須用泡沫海綿蘸少許肥皂粉或清潔劑*清潔。清洗干凈的玻璃板應放在玻璃板架上，用水晾干后方可使用。
         (二)組裝電泳槽
        A. 1、將四顆固定螺絲插入儲液架（半上罐）對應的孔中，然后將儲液架放在工作臺上。
         2、左手握住凹槽膠?？?，右手拇指和中指握住玻璃板的兩邊緣，插入膠?？颍ㄗ⒁馐种覆荒芘龅讲ＡО逶谀z面上）。
         3、將帶玻璃的橡膠?？蚍旁趦σ汗蘅蚣艿纳蟼?，其下緣必須與儲液罐框架的下緣對齊。
         4. 用雙手拿起另一個(gè)儲液罐架，將其與桌面背面的儲液罐架對齊，并在位于儲液架有機玻璃架的橡膠架上做凸線(xiàn)坦克。
         5. 安裝四個(gè)螺母并擰緊螺釘。注意擰緊螺絲時(shí)用力要均勻，用雙手以斜角逐漸擰緊螺絲。
         6. 將電泳槽垂直豎立，放在桌面上。玻璃板較短的儲罐稱(chēng)為上罐（陰），玻璃板較長(cháng)的儲罐稱(chēng)為下罐（陽(yáng)）。它在長(cháng)玻璃板上。膠框之間有間隙。這個(gè)間隙可以沿著(zhù)長(cháng)玻璃板的下端用融化的 10% 瓊脂填充。為防止氣泡滯留，可將一端稍稍抬起，將氣泡趕走。瓊脂*凝固后即可倒入凝膠。
         B、也可以垂直豎起凹槽，將裝有玻璃的橡膠?？蛑苯臃湃氚疾壑?，對稱(chēng)擰緊螺絲，用瓊脂封底。
         (3)澆注膠
        1、先澆分離膠，凝固后再澆濃縮膠。灌膠前先連接冷卻水，夾住連接上下液槽的兩根膠管。
         2、用細尖滴管吸膠，從一端沿長(cháng)短玻璃板的縫隙加入膠水。為了防止氣泡，把另一端稍微拿起（氣泡往高處），繼續加膠水。對于單層膠（分離膠），加膠量距離短玻璃板頂部0.3厘米左右。輕輕加入少許水，用雙手輕輕插入梳子。膠凝后，可以形成一個(gè)凹進(jìn)的樣品孔。
         3、為防止漏膠，應立即在上下儲液罐中加入蒸餾水，但蒸餾水不能太短于玻璃板邊緣。
         4.凝膠凝固后，可以看到樣品槽梳子和凝膠板之間有一層亮區
        具有不同的發(fā)射率。
         (四)取樣
        1. 松開(kāi)連接上下水箱的兩根橡膠管上的夾子，放掉水箱中的蒸餾水，待水流出后再夾上夾子。
         2、用雙手輕輕取出樣品梳，可以看到清晰的樣品孔，并吸去孔內的水分（注意不要損壞孔的字面）。
         3、上下儲液罐加慢；中間液體，液體高度應*超過(guò)上液罐的短玻璃板邊緣。
         4、用微量注射器吸取一定量的樣品加入長(cháng)短玻璃板之間的凹凝膠樣品孔中（注意加入樣品的動(dòng)作要輕，針頭不能損壞橡膠表面）。
         (五)電泳
        一根儲罐線(xiàn)接電泳儀負極，下儲罐線(xiàn)接電泳儀正極。檢查接線(xiàn)是否正確，即可按要求的電壓和電流進(jìn)行電泳。
         (六)拆膠板
        電泳結束后，松開(kāi)螺母，取出膠框，撕下玻璃板，在兩塊玻璃板下角之間的縫隙中，用刀片背面輕輕一撬膠面將玻璃板分開(kāi)，將帶有橡膠板的玻璃板放在桌面上，用雙手沿著(zhù)凝膠底部輕輕握住薄膜，然后將其放入一個(gè)大的培養皿中進(jìn)行染色。漂洗脫色后可以清晰地看到橡膠板。條帶分離
        常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法： 1、紋路和拖尾：是樣品溶解不良造成的?？朔姆椒梢栽诩訕忧跋入x心，加一些尿素等增溶輔助試劑。
         2. 蛋白條帶太寬。當連接到相鄰泳道的蛋白條帶時(shí)，由于上樣量過(guò)大，可以減少上樣量。
         3. 電泳時(shí)間比平時(shí)長(cháng)?？赡苁怯捎谀z緩沖體系和電極緩沖體系的pH選擇錯誤，即緩沖體系的pH與被分離物質(zhì)的等電點(diǎn)相差過(guò)小，或者被分離物質(zhì)的離子強度。緩沖系統過(guò)高。
         4. 指示器變成微笑符號（指示器正面顯示向上的曲線(xiàn)），說(shuō)明凝膠冷卻不均勻，中間部分冷卻不好，導致分子的流動(dòng)性不同。
         5. 由于電泳槽的原因，指示器變成哭臉?lè )枺ㄖ甘酒髡娉氏蛳碌那€(xiàn)）該裝置不適用，特別是凝膠和玻璃板組成的“夾心"底部有氣泡或隔膜附近的凝膠未*聚合時(shí)。
         6.凝膠時(shí)間錯誤。通常凝膠會(huì )在 60 分鐘，1 小時(shí)內凝固。如果設定時(shí)間太慢，可能是TEMEN、APS劑量不夠或失效。 APS現在應該準備好使用了，TEMED不穩定，容易被氧化成黃色。如果凝固過(guò)快，可能是 APS 和 TEMED 的量過(guò)多。這時(shí)候凝膠太硬容易開(kāi)裂，電泳時(shí)容易燒壞凝膠。