如何選擇紫外分光光度計
紫外分光光度計廣泛用于實(shí)驗室研究。如何選購紫外分光光度計對于科研人員來(lái)說(shuō)非常重要。如何選擇紫外分光光度計?
紫外分光光度計的選擇主要考慮光學(xué)結構、光譜范圍、樣品類(lèi)型和分析工具。
研究人員有許多新的紫外分光光度計可供選擇。自從60年前紫外分光光度計出現在實(shí)驗室的工作臺上以來(lái),這種可以解決廣泛?jiǎn)?wèn)題的儀器可以從單波長(cháng)測量到高性能多光譜測量和分析??茖W(xué)家在選擇時(shí)需要考慮自己實(shí)驗室的需求和目的。光學(xué)結構和光源、檢測方法、樣品類(lèi)型和數據處理都是需要考慮的因素。
光學(xué)配置
一般來(lái)說(shuō),紫外分光光度計分為單光束和雙光束兩種。顧名思義,單光束型主要依靠單光束進(jìn)行測量。給定波長(cháng)的光束通過(guò)對照,然后通過(guò)實(shí)際樣品溶液以獲得吸光度結果。
雙光束型采用鏡面斬波輪將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實(shí)際樣品??梢韵薅鹊販p少光漂移(燈漂移)并減少測量時(shí)間。有些雙光型光度計不使用斬波輪,而是使用分束器將一束光分成兩束平行光束,然后同時(shí)測量對照樣品和目標樣品。由于測量速度的提高,雙光束分光光度計在測量某些溶液隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化的研究中非常有用。
數據管理
大多數獨立的分光光度計都包含驅動(dòng)儀器操作和管理數據的軟件。高性能儀器通常與 PC 結合使用,需要制造商提供額外的軟件。同時(shí),用戶(hù)還可以選擇升級軟件以滿(mǎn)足自己的需求。
另一個(gè)值得考慮的因素是數據的最終用途。每個(gè)獨立實(shí)驗室都有自己感興趣的實(shí)驗結果。例如,一些藥品機構需要考慮美國FDA的要求和歐盟藥品評價(jià)機構的要求,選擇不同的數據處理方式。
光源及檢測方式(LIGHT SOURCES AND DETECTION)
分光光度計的光譜也是一個(gè)需要考慮的重要因素。實(shí)驗室研究人員希望希望省錢(qián),購買(mǎi)專(zhuān)用設備來(lái)量化核酸、蛋白質(zhì)或細菌的生長(cháng)情況。
紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長(cháng),通常使用氘燈進(jìn)行照明。一些特殊的儀器可以提供滿(mǎn)足光子學(xué)和半導體研究需要的光譜范圍。
有些儀器有多種光源可供選擇:紫外光、可見(jiàn)光甚至紅外光(780nm到3000nm)。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見(jiàn)光部分(約380nm到800nm)。氙氣燈可以覆蓋紫外和可見(jiàn)光區域。
分光光度計的帶寬很大程度上取決于單色器狹縫的寬度??梢詼蚀_地投影出實(shí)驗所需的光譜。嚴格的帶寬允許儀器對復雜混合物進(jìn)行高分辨率的吸光度測量??勺儐紊鞯莫M縫寬度使分光光度計能夠滿(mǎn)足各種實(shí)驗需要。
為了測量吸光度值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管(PMT)和光電二極管。 PMT 提供快速的響應時(shí)間和良好的靈敏度,并且可以調整到 UV 光譜中的特定范圍。但是一些制造商依靠光電二極管的動(dòng)態(tài)范圍在幾秒鐘內執行所有光譜測量。
樣本格式
在大多數樣品類(lèi)型中,分光光度計可以接受樣品孔、小玻璃管、比色皿、吸管和微孔板。微孔板主要是為了滿(mǎn)足高通量、大型實(shí)驗室的需求。但即使對于小型實(shí)驗室,廠(chǎng)家仍然提供各種容器轉換器來(lái)滿(mǎn)足吞吐量要求并減少實(shí)驗時(shí)間。
比色皿的進(jìn)樣量一般從1μl到5ml不等,有的儀器配備了各種樣品夾具,以滿(mǎn)足各種變化的需要。體現靈活性。
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